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β-gal 報告基因染色試劑盒

更新日期↟╃✘│:2021-07-12

訪問量↟╃✘│:468

廠商性質↟╃✘│:生產廠家

所在城市↟╃✘│:上海市

簡要描述↟╃✘│:
大腸桿菌中的LacZ基因編碼產物為β-半乳糖苷酶(β-galactosidase╃•╃◕,β-gal)╃•╃◕,β-gal較穩定╃•╃◕,能抵抗蛋白酶的水解╃•╃◕,並可催化其底物X-gal產生藍色產物╃•╃◕,所以可以方便地檢測出LacZ基因的表達☁◕◕▩。因而╃•╃◕,LacZ基因或β-gal常用來作為報告基因╃•╃◕,檢測表達載體介導的基因轉移表達效率╃•╃◕,此外╃•╃◕,也常用於基因啟動子活性的研究☁◕◕▩。
品牌自營品牌供貨週期現貨
應用領域醫療衛生,生物產業

 

我公司的β-半乳糖苷酶(β-gal)報告基因染色試劑盒利用X-gal作為底物╃•╃◕,配合試劑盒內提供的其他試劑╃•╃◕,可對固定後的細胞◕╃•、組織冰凍切片中的β-gal進行顯色╃•╃◕,陽性結果表現為藍色☁◕◕▩。

包裝清單↟╃✘│:

產品編號產品名稱規格
SJ1233

β-半乳糖苷酶(β-gal)

報告基因染色試劑盒

100ML
說明書一份

儲存條件↟╃✘│:

-20℃儲存╃•╃◕,一年有效☁◕◕▩。其中X-Gal溶液需避光儲存☁◕◕▩。

產品組成↟╃✘│:

產品名稱編號名稱

β-半乳糖苷酶(β-gal)

報告基因染色試劑盒

SJ1233-A試劑A
SJ1233-B試劑B
SJ1233-C試劑C
SJ1233-D試劑D(X-gal)
SJ1233-E試劑E(10× PBS)

使用方法:

使用前先將10 × PBS用去離子水稀釋至1× PBS☁◕◕▩。

染色工作液需現配現用╃•╃◕,配製方法如下↟╃✘│:

名稱用量
試劑(A)25 ul
試劑(B)25 ul
試劑(C)25 ul
試劑D(X-gal)125 ul
試劑E(1× PBS)2.3 ml
總量2.5 ml

1◕╃•、細胞樣品染色

1)培養的貼壁細胞處理完成後╃•╃◕,用4%的多聚甲醛固定10分鐘後╃•╃◕,用PBS洗三次╃•╃◕,每次5分鐘╃•╃◕,去除多餘的PBS;

2)加入適量的染色工作液╃•╃◕,放入37℃溫箱孵育1-24小時(35mm培養皿或6孔板一般使用1.5-2.0ml/皿(孔)╃•╃◕,其他規格的培養皿或培養板可依據培養面積的大小適量增加或減少染色液的量);

3)在顯微鏡下觀察╃•╃◕,當染成藍色的細胞顏色適中時╃•╃◕,去除染色液╃•╃◕,用1× PBS洗三次☁◕◕▩。

4)加入適量1× PBS╃•╃◕,鏡下觀察◕╃•、拍照(染色後的標本可在4℃儲存一週)

2◕╃•、組織冰凍切片染色

1)組織冰凍切片先用去離水洗滌3次╃•╃◕,每次5分鐘╃•╃◕,去除OCT膠;

2)用PBS洗滌切片3次╃•╃◕,吸除PBS;

3)滴加染色工作液;

4)37℃孵育1-24小時╃•╃◕,直至切片中的細胞的顏色變藍☁◕◕▩。孵育過程最好在溫盒中進行╃•╃◕,以防止染色液蒸發☁◕◕▩。

 

5)吸除染色工作液╃•╃◕,用PBS洗滌切片3次╃•╃◕,每次5分鐘☁◕◕▩。  

6)水性封片劑封片後╃•╃◕,鏡下觀察☁◕◕▩。染色後的標本片在4℃可儲存數天☁◕◕▩。

3◕╃•、小組織塊染色

1)組織塊在4%的多聚甲醛固定液中充分固定後╃•╃◕,用自來水沖洗儘量去除固定劑;

2)用PBS浸泡組織塊5-10分種;

3)將組織塊轉移至染色液中╃•╃◕,37℃孵育1-24小時(染色液的用量儘量大於組織塊體積的10倍);

4)組織塊中出現藍色著色後╃•╃◕,去除染色液╃•╃◕,PBS洗滌三次╃•╃◕,每次5分種☁◕◕▩。

5)對組織進行拍照╃•╃◕,或將組織塊進行冰凍切片後鏡下觀察☁◕◕▩。 

注意事項:

1◕╃•、在石蠟包埋的過程中β-半乳糖苷酶可能失活╃•╃◕,從而造成染色失敗╃•╃◕,因此本試劑盒不建議用於石蠟切片的檢測☁◕◕▩。如果一定要用於石蠟切片的檢測╃•╃◕,建議自行對實驗條件進行一定的最佳化☁◕◕▩。

2◕╃•、染色時間較長時╃•╃◕,請在溫盒中進行╃•╃◕,或是增加染色液的量╃•╃◕,以防染色液蒸發變幹☁◕◕▩。

   3◕╃•、染色後應及時觀察◕╃•、拍照☁◕◕▩。放置過久由於藍色產物的擴散╃•╃◕,可能會出現部分假陽性☁◕◕▩。

備註↟╃✘│:

          產品資訊可能會有最佳化升級╃•╃◕,請以實際標籤資訊為準☁◕◕▩。

 本產品僅供科研使用☁◕◕▩。請勿用於醫藥◕╃•、臨床診斷或治療╃•╃◕,食品及化妝品等用途☁◕◕▩。請勿存放於普通住宅區☁◕◕▩。

 

 為了您的安全和健康╃•╃◕,請在實驗過程中做好防護工作☁◕◕▩。

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